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誤區(qū)1：HPLC柱不可以反沖這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設(shè)計的耐壓值是遠(yuǎn)高于最大操作壓力的。換柱時反沖可以清洗柱頭一些具有強(qiáng)吸附性質(zhì)的物質(zhì)，我們沖洗出這些殘留物質(zhì)也是為了防止壓力增大。但是如果你購買的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料，這時你反沖會沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。誤區(qū)2：所有的C18（L1）色譜柱都是一樣的這是不正確的。在早期的HPLC體系中，C18是僅有的反向色譜的鍵合固定相，因此C18就作為了反向色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。但...

色譜填料技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復(fù)雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對運(yùn)動時，這些物質(zhì)隨流動相一起運(yùn)動，并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。如今，色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)中尤其是食品藥品行業(yè)，高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實(shí)驗(yàn)室檢測部門的標(biāo)配。在制藥行業(yè)，色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產(chǎn)品主要的生產(chǎn)設(shè)備。色譜填料的選擇要點(diǎn)有哪些呢？一、硅膠基質(zhì)填料硅膠是H...

經(jīng)常做蛋白質(zhì)純化分離實(shí)驗(yàn)的色譜工作者，對于疏水色譜（Hydrophobicinteractionchromatography，簡寫HIC）肯定不陌生，血清蛋白、膜結(jié)合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等化合物純化都需要用HIC色譜法。HIC在是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同，用流動相洗脫時，各組分遷移速度不同而達(dá)到分離的目的。疏水相互作用色譜法具有對蛋白質(zhì)的回收率高，蛋白質(zhì)不失活，蛋白質(zhì)變性可能性小等優(yōu)點(diǎn)。疏水作用色譜固定相的非極性比較弱，流動相多采用高濃度鹽緩沖液進(jìn)行梯度...

氣相色譜(gaschromatography簡稱GC)是分離和鑒定低分子量氣體或揮發(fā)性液體的理想技術(shù)，它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。氣相色譜可分為氣固色譜和氣液色譜。高效液相色譜法的原理與氣相色譜法的原理相同。但是氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對熱不穩(wěn)定物質(zhì)，而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，有些樣品因?yàn)殡y以汽化而不能通過柱子，熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會發(fā)生分解，也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。清楚了解這兩種分離技術(shù)之間...

恒譜生建議各位色譜操作者在進(jìn)行液相色譜分析前，關(guān)注樣品過濾的重要性，這是為什么呢？主要是為防止蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉積在色譜柱上，上柱前需對生物樣品進(jìn)行去蛋白的預(yù)處理。這樣可以延長色譜柱壽命并減少維護(hù)成本，從而有助于提高實(shí)驗(yàn)室通量。脫蛋白對于分析生物液體（例如血漿，血清，尿液和腦脊髓液）中的抗生素，殘留農(nóng)藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質(zhì)從樣品中去除，會導(dǎo)致色譜柱性能下降，最終影響色譜分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品中去除蛋白質(zhì)的處理方法有3種：利用蛋白質(zhì)脫水沉淀。采用...

色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢。一個趨勢是快速液相，利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3μm的填料應(yīng)用，在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很用有的，3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而，3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時，柱效提高意味...