UHPLC是一種專門的液相色譜方法,與 HPLC 相比,它運行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 µm)的較小色譜柱來實現(xiàn)這一點。生物化學、細胞和分子生物學、臨床醫(yī)學和許多其他領域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學物質(zhì)。
盡管 UHPLC 的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用 UHPLC 時,恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。
為什么選擇 UHPLC?
盡管 UHPLC 和 HPLC 在各種情況下都有優(yōu)勢,但有時 UHPLC 顯然是*。特別是,UHPLC 提供了更好的分離度,因為它們的柱子顆粒更小。但研究人員并不總是需要這種能力。恒譜生建議您需要考慮哪種分離將在可管理的時間內(nèi)提供最佳效率。如果您在五分鐘內(nèi)分離兩種組分并且每天只進行幾次分析,則不太可能需要 UHPLC,因為 HPLC 的分離度既足夠又相對快速。
即使您不需要更高的分離能力,UHPLC 仍然可以提高您的通量。更高的色譜分離度可用于提高復雜樣品的分離能力,或通過使用更短的分析色譜柱并保持分離度來提高分析速度,因此無論是高通量應用還是高分辨率分析,都將從 UHPLC 中獲益最多。
選擇 UHPLC 的注意事項
UHPLC 在色譜柱內(nèi)使用較小的顆粒,恒譜生1.8粒徑的超純硅膠色譜填料能夠讓您的色譜分析效果與速度大大提升。粒徑和形狀緊密分布,減少背壓,批次穩(wěn)定性一致,可重復利用。因為使用比較小的粒徑所以需要更大的力來驅動溶劑和樣品通過色譜柱。
UHPLC 需要能夠在比 HPLC 中使用的泵更高的壓力下工作的泵。另一方面,雖然 UHPLC 系統(tǒng)的初始成本通常高于其對應的 HPLC 系統(tǒng),但總體擁有成本實際上可能更低。與 HPLC 系統(tǒng)相比,UHPLC 系統(tǒng)可以用更少的試劑產(chǎn)生更快的結果,并且增加的通量可以提高生產(chǎn)力。在這種情況下,UHPLC 系統(tǒng)較高的初始成本實際上可能會在幾年內(nèi)節(jié)省實驗室資金。
盡管存在差異,但新型柱填料開始模糊 HPLC 和 UHPLC 之間的界限。例如,對于 HPLC 和 UHPLC,新的“核殼”或“多孔”顆粒提供比傳統(tǒng)柱顆粒更好的性能。核殼顆粒具有更大的表面積,這意味著它們在較低的工作壓力下優(yōu)于傳統(tǒng)的顆粒表親。對于 HPLC 和 UHPLC,平衡設備成本和性能變得更加靈活。無論您需要簡單的高通量分離還是更高的分離能力,UHPLC 都在不斷發(fā)展以滿足比以往更多類型的需求。